动脉粥样硬化（AS）是一种严重危害人类健康的慢性心血管疾病，是老年人常见的死亡原因之一。AS的主要特征是部分动脉内的脂质沉积，并伴随平滑肌细胞（SMCs）及纤维基质的增生，最终发展为AS斑块。而血管钙化（VC）则是一种病理现象，主要表现在动脉和静脉壁中磷酸钙的沉积。AS、糖尿病和慢性肾病患者都面临着发生VC的高风险。氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）在血管壁中的积累是AS和VC发展的关键因素之一。研究显示，在AS脑梗死患者的血清中发现高表达的ox-LDL，其被认为能够加速颈动脉斑块的形成并促进不稳定斑块的脱落，成为脑血管疾病的独立危险因素。因此，ox-LDL作为一个重要的致病因子，为AS研究提供了有效的模型。

AS的发病机制十分复杂，细胞损伤、泡沫化与钙化等过程相互交织，且并不存在严格的发生顺序，但一般认为内皮细胞的损伤是动脉粥样硬化的起始步骤。在高血脂、高血压、吸烟及糖尿病等多重因素的影响下，血管内皮细胞受到损害，其通透性增加，导致血液中的脂质及炎症细胞进入内皮下层。经过损伤的内皮细胞使得低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等脂质通过氧化修饰形成ox-LDL。ox-LDL被巨噬细胞吞噬后，在细胞内形成大量脂滴，巨噬细胞因此转化为泡沫细胞，该过程是动脉粥样硬化早期病变的关键。随着AS病变的进展，平滑肌细胞在病灶部位增殖、迁移并发生表型转变，同时大量产生细胞外基质。局部炎症反应及细胞死亡释放促钙化因子，如碱性磷酸酶，促使钙盐在血管壁沉积，从而导致血管钙化，最终使得血管壁变得更加坚硬和脆弱，进一步加剧血管病变。

ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞HUVECs损伤模型

1、实验细胞：人脐静脉内皮细胞HUVECs（购自美国典型培养物保藏中心，ATCC）。

2、诱导内皮细胞损伤的方法：
① HUVECs接种后，使用不同浓度的PFE（15、30、75μg/mL）预处理2小时（注：PFE是从芫荽种子中提取的黄酮类化合物）。
② ox-LDL刺激：移除预处理培养基，加入含100μg/mL的ox-LDL的新鲜培养基，继续培养24小时以诱导内皮损伤。此模型通过ox-LDL诱导内皮炎症及粘附分子的表达，模拟动脉粥样硬化早期内皮损伤，适用于研究抗动脉粥样硬化药物（如PFE）的机制。

ox-LDL诱导巨噬细胞RAW2647泡沫化模型

1、实验细胞：巨噬细胞系RAW2647（购自美国典型培养物保藏中心，ATCC）。

2、诱导泡沫化的方法：
① 实验组采用PFE（从芫荽种子中提取的黄酮类化合物）进行不同浓度（15、30、75μg/mL）的预处理2小时，对照组不加PFE。
② ox-LDL刺激：添加ox-LDL至最终浓度100μg/mL，与细胞共孵育24小时。检测指标包括油红O染色以观察脂质积累及泡沫化程度，并应用RT-PCR/Western blot检测胆固醇流入（LOX-1、CXCL16）和流出（ABCA1、ABCG1、SR-B1）的相关基因表达。此模型成功诱导RAW2647巨噬细胞转化为泡沫细胞，并验证药物PFE通过PPARγ-ABCA1/ABCG1通路促进胆固醇的流出，抑制泡沫化过程。

ox-LDL诱导平滑肌细胞SMCs钙化模型

1、实验细胞：人主动脉血管平滑肌细胞HA-SMCs（购自中国CTCC细胞库）。

2、钙化造模的方法：
① 将HA-SMCs分为对照组和钙化造模组，传代后的细胞饥饿24小时，对照组换完全培养基；
② 造模组换钙化培养基：10mmol/L的β-甘油磷酸+50μg/mL的L-抗坏血酸+100nmol/L的地塞米松，并加入50μg/mL浓度的ox-LDL诱导细胞14天；
③ 利用茜素红染色显示钙化造模组与对照组相比明显出现橘红色的钙化结节，成功建立钙化模型。该模型通过筛选ox-LDL的最佳诱导浓度，适用于研究特定抗炎因子（如IL-37）对钙化进程及其分子机制的影响。

在动脉粥样硬化研究的漫长探索中，ox-LDL无疑是我们手中的“金钥匙”。借助于上述精心设计的细胞模型构建方法，我们能够深入探讨其在疾病进展中的机制。作为研究的坚实后盾，尊龙凯时将提供各类优质试剂与产品，助力您在动脉粥样硬化研究领域不断取得重要突破，推动科学的发展。

参考文献：
[1] Liu J, Zhang W, Li Y, et al. Flavonoids extract from the seed of Psoralea corylifolia L. (PFE) alleviates atherosclerosis in high-fat diet-induced LDLR-/- mice. Phytomedicine 2022; 98:153983. doi:10.1016/j.phymed.2022.153983.
[2] 马晨越. IL-37抑制人主动脉血管平滑肌细胞钙化并参与抑制其成骨转化的研究[D]. 安徽医科大学, 2023.