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NEWS每日推荐:尊龙凯时美森细胞NCI-H3255人肺腺癌细胞特性与培养指南
来源:尤彬芳 日期:2025-09-08尊龙凯时的NCI-H3255细胞系是一种来源于人肺腺癌的细胞模型,显著特点是具备EGFR基因的L858R点突变。这一突变导致表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶的持续激活,赋予该细胞系在EGFR突变型肺癌研究中的重要价值,尤其在靶向治疗和耐药机制的探索上,成为经典模型。
该细胞系对第一代EGFR酪氨酸激酶抑制剂(如吉非替尼和厄洛替尼)表现出高度敏感,因此广泛应用于肺癌靶向治疗的研究及耐药机制的探索上。NCI-H3255细胞呈现上皮样细胞形态,依赖EGFR信号通路进行细胞增殖。L858R突变在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中非常普遍,并与EGFR-TKI药物的临床敏感性密切相关。
这些细胞的增殖速度适中,群体倍增时间约为30-40小时。初步的实验表明,此细胞系在吉非替尼等EGFR-TKI面前高度敏感,长期暴露于逐步增加浓度的TKI药物可以诱导获得性耐药,适合用于研究TKI耐药的各种机制,如T790M突变、MET扩增和细胞表型转化等。
基本培养基为RPMI-1640,添加10%胎牛血清(FBS)、1%青霉素-链霉素和1%L-谷氨酰胺。培养条件设定为37°C和5% CO₂。细胞传代使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化,按照1:3至1:5的比例进行传代,每周2-3次。此外,需定期通过DNA测序确认EGFR L858R突变的存在,以保证模型的准确性,并建议进行STR鉴定以确保细胞的身份唯一性。
在细胞培养过程中,定期监测支原体污染,并评估细胞对吉非替尼的IC50值以监控其敏感性稳定性。NCI-H3255细胞系在以下研究领域具有显著价值:
在细胞冻存时,建议使用含10% DMSO的冻存液并采用程序降温方法保存低代次种子细胞库存。由于该细胞系携带特定EGFR突变,在将实验结果推广至其他突变类型或野生型肺癌细胞时需保持谨慎。在培养过程中,若发现细胞形态或生长特性显著变化,建议重新验证突变状态。
NCI-H3255细胞系是研究EGFR突变型肺腺癌靶向治疗的重要模型之一。其对EGFR-TKI的高度敏感性与明确的遗传背景,使其在药物开发、耐药机制研究及个性化治疗策略探索中具有不可替代的价值。科学规范的培养流程和定期的基因背景验证是确保实验结果可靠性的基础,也正是尊龙凯时致力于提供高品质细胞模型的核心所在。
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